Adenovirus snabbtest-nasal utsöndring

Avsedd användning:

SARS-CoV-2 Nucleic Acid Test kit är tillämplig på kvalitativ detektion av nukleinsyra av COVID-19 i nasofaryngeala vattpinnar, orofaryngeala vattpinnar och sputum. Testresultaten ger molekylär diagnosbas för infektion eller misstänkta patienter och bör inte användas som enda kriterium för klinisk diagnos.

Material:

Testförfarande:

A. Provberedning

Extraherat RNA är utgångsmaterialet för SARS-CoV-2 Nucleic Acid Test kit.

Viktigt: Varje nukleinsyraextraktionsprocedur måste utföras samtidigt med en positiv kontroll (40 μL, späd med sterila saltlösningar / PBS till önskad volym) och en negativ kontroll (40 μL, späd med sterila saltlösningar / PBS till önskad volym).

Det rekommenderas att använda följande kommersiella nukleinsyraextraktionssatser: PureLinkTM Viral RNA / DNA Mini Kit (Invitrogen); Viralt RNA Mini-kit (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA-kit (TIANGEN);

B. Inställning av reaktionsmix

1. Alla reagenser och prover ska tinas helt, blandas fullständigt och centrifugeras kort vid rumstemperatur (ungefärligt intervall 18 till 25 °C) före användning.

2. Förbered den erforderliga volymen av reaktionsblandningen i ett lämpligt storlek på polypropenmikrocentrifugröret.

3. Pipett 25 μL av reaktionsblandningen i varje erforderlig brunn av en lämplig optisk 96-brunnsreaktionsplatta eller ett lämpligt optiskt reaktionsrör.

C. Tillägg av mall

1. Tillsätt 5 μL extraherat RNA från prover / positiv kontroll / negativ kontroll. Den totala volymen är 30 μL.

2. Blanda proverna och kontrollerna noggrant med reaktionsblandningen genom att pipettera upp och ner / virvel.

3. Stäng reaktionsplattan med 96 brunnar med lämpliga lock eller optisk självhäftande film och reaktionsrören med lämpliga lock.

4. Centrifugera reaktionsplattan med 96 brunnar i en centrifug med en mikrotiterplattrotor i 30 sekunder vid cirka 2500 rpm.

D. Programmering av PCR-instrumentet i realtid

För grundläggande information om installation och programmering av de olika PCR-instrumenten i realtid, se användarhandboken för respektive instrument. Analysen har optimerats för ABI7500 Real-Time PCR-systemet. PCR-körningen utförs med cykelförhållanden som beskrivs i tabellen nedan.

Definiera fluorescensdetektorerna

*Ställ in instrumentets interna fluorescensreferens till "Ingen", till exempel: För instrument i ABI-serien ställer du in "Passiv referens" på "Ingen".

E. Analys av data

Ställ in analysparametrarna och analysera data enligt bruksanvisningen för de relevanta instrumenten.

Ta ABI 7500 som exempel:

Baslinjen bör ställas in på ett intervall som eliminerar bakgrundsfluorescensen som finns i de tidiga förstärkningscyklerna, men som inte överlappar det område där förstärkningssignaler stiger över bakgrunden (Startvärde: 3 ~ 10; Slutvärde: 10-20). Cykeltröskeln (Ct) bör ligga i basen av exponentialfasen. Klicka på "Analys" för att få analysresultatet automatiskt och läs detekteringsresultatet i fönstret "Rapport".

Populära Taggar: adenovirus snabb test-nasal sekretion, Kina, leverantörer, tillverkare, fabrik, bulk